Sigma原装 H0137

HT（原装） H0137

产品简介：

货号：H0137

产品品牌：sigma

产品名称：HT（原装） H0137

产品明细：

详细说明：

本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组，不适合于RNA病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤：
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、取病毒上清液0.5ml，12000rpm离心5min，尽量吸尽上清使用，弃去沉淀。
2、向病毒上清中加入20ul的蛋白酶K（10mg/ml），充分混匀，65℃消化10-20min，期间可颠倒离心管混匀数次。
3、向管中加入500ul结合液，充分混匀。再向管中加入400ul无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中，静置2min。（吸附柱的大容积为750ul，可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。）
4、12000rpm离心2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
7、12000rpm离心2min，将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除， 否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
8、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50ul-100ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置5min，12000rpm离心1min。
9、离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心2min，即可得到高质量的病毒基因组DNA。

公司简介

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