Pfu DNA Polymerase

 Pfu DNA Polymerase
目录号 包装 价格
PC1300-500 500U 180.00
PC1300-1000 1000U 320.00
产品简介：本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcus
furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出
来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外
切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却
不能，其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等
虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase
中出错率低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的
延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定
性更好，95℃ 1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模
板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为
平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用
于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基
因点突变分析（SNP）和末端补平等。
活性定义：1单位（U） Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃，30
分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol
脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制检测：SDS-PAGE检测纯度大于
99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；
能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显
活性改变。
产品内容：
酶储存缓冲液 10×Pfu Buffer
50 mM Tris-HCl （pH 8.2） 200 mM Tris-HCl （pH 8.8）
0.1 mM EDTA 100 mM KCl
1 mM DTT 100 mM （NH4）2SO4
50% glycerol 20 mM MgSO4
Stabilizers 1%Triton X-100
其它
注意事项：
1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃，有效期12个月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的
吸头。
3、用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱
基，Tm值在55-80℃之间，引物浓度在0.1-0.5uM之间，比Taq
酶略高。